无码,午夜_午夜传媒无码综合_色婷婷无码一区二区_国产精品成人四区在线观看在线观看_久操网在线观看视频_爆乳 人妻 中出_浪潮婷婷伊人_午夜乱操精品无码不卡_神马久麻_久久久神马A_伊人亚洲午夜人妻_午夜孟交_午夜电影你懂的,国产人A片在线乱码视频,66亚洲一卡2卡新区成片发布,欧美性做爰又大又粗又长,亚洲中文字幕无码一区日日添,日本高清免费毛片大全,黄色一级视频免费看,国产高清免费无码不卡视频,丁香花高清在线观看完整版,做爰高潮全过程免费观,在线中文字幕无码制服一区,无码人妻精品一区二区蜜桃,欧美乱妇日本无乱码特黄大片,精品无码国产污污污免费网站 ,青青草国产精品亚洲专区无码,巨胸爆乳美女漏双奶头片,国产在线精品无码一区二区三区 ,美女夫妻内射潮视频,久久久久亚洲无码专区喷水,久久精品国产熟女亚洲麻豆,国产中文字幕亚洲,国产精品欧洲激情无码,电影三级片,黄色无码乱伦小说,日本强伦片中文字幕免费看,麻豆传煤网站入口下载,国产精品福利tumblr,亚洲图片欧美天堂,郭美美17.2g ed2k,国内精品久久久久久久,国产亚洲另类精品

大鼠細胞培養操作步驟：

1、細胞傳代：

細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；
③-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間min左右，加入4-5ml培養基混勻。
②在000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。
3、細胞凍存：

待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗-2次，加入mL 0.25%（T25瓶）
②-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入*培養基終止消化；
③將細胞懸液000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。